Деннис Тейлор – Биология. В 3-х томах. Т. 1 (страница 79)
2. Использование водных растений вместо кусочков листа. Можно взять и водные растения типа элодеи, только нужно их хорошенько промыть в дистиллированной воде, чтобы удалить все остатки загрязнений и озерной воды и таким образом свести к минимуму участие микроорганизмов в изучаемом процессе. Такие растения кладут прямо в раствор индикатора так, чтобы они были полностью покрыты раствором. Сам по себе индикатор почти не влияет на растение во время опыта.
9.8. Фотодыхание и С4-фотосинтез
9.8.1. Фотодыхание
Как полагают, фотосинтез возник, когда атмосфера была намного богаче двуокисью углерода, чем теперь, а кислорода в ней было очень маловероятно, около 0,02% (сейчас-21%). Уже в 1920 г. стало известно, что кислород обычно подавляет фотосинтез, однако причины этого были выяснены только в 1971 г. Оказалось, что для фермента, фиксирующего СО2, т. е. рибулозобисфосфат-карбоксилазы, субстратом может служить не только двуокись углерода, но и кислород. Действительно, эти два газа конкурируют за один и тот же активный центр. Если с ферментом взаимодействует кислород, то катализируется такая реакция:
Реакция 1 называется оксигенацией; поэтому один и тот же фермент называют рибулозобисфосфатоксигеназой, когда он катализирует эту реакцию, и рибулозобисфосфат-карбоксилазой, когда он участвует в реакции 2. Вместо двух молекул фосфоглицериновой кислоты (ФГК), образующихся в ходе реакции 2, во время реакции 1 образуется одна молекула ФГК и одна молекула фосфогликолата. Фосфатная группа сразу же отщепляется, и фосфогликолат (фосфогликолевая кислота) превращается в гликолат (гликолевую кислоту).
Поэтому кислород является конкурентным ингибитором (разд. 6.5) фиксации СО2, и всякое повышение концентрации кислорода способствует поглощению его самого, а не СО2, и таким образом ингибирует фотосинтез. И наоборот, всякое повышение концентрации СО2 будет благоприятствовать реакции карбоксилирования.
Теперь возникает новая проблема: а что же растению делать с гликолатом? Для его использования у растения имеется метаболический путь, называемый фотодыханием. Можно дать такое определение: фотодыхание — это зависимое от света потребление кислорода с выделением двуокиси углерода на свету. Оно не имеет никакого отношения к обычному дыханию (которое теперь иногда называют темновым дыханием, чтобы избежать путаницы) и похоже на него лишь тем, что здесь тоже используется кислород и тоже выделяется СО2. Фотодыхание — светозависимый процесс, так как рибулозобисфосфат — один из продуктов цикла Кальвина — образуется только тогда, когда идет фотосинтез. Назначение фотодыхания — вернуть в цикл хотя бы часть углерода из гликолата, который накапливается в избытке. Схема этого процесса представлена на рис. 9.28. Многие детали здесь для нас несущественны, но следует отметить четыре главных факта:
Рис. 9.28. А Путь фотодыхания. Обратите внимание, что в этом процессе используется кислород и образуется двуокись углерода. Кроме того, используется еще и РиБФ, а он образуется только на свету в процессе фотосинтеза. Б. Электронная микрофотография, демонстрирующая типичную для клеток мезофилла тесную связь между хлоропластами, пероксисомами и митохондриями, × 38700
1. Кислород используется а) при окислении гликолата до глиоксилата в пероксисомах и 6) при окислении глицина до серина в митохондриях.
2. Когда глицин окисляется до серина, углерод бесполезно теряется в виде СО2.
3. Бесполезно теряется и энергия, так как расходуются НАДФ·Н2 и АТФ. Хотя во время превращения глицина в серии и синтезируется АТФ, процесс в целом идет с затратой энергии.
4. В процессе участвуют три разные органеллы — хлоропласты, пероксисомы и митохондрии. Пероксисомы были кратко описаны в гл. 7 (рис. 7.6).
В итоге из двух молекул гликолата (2×2 атома С) образуется одна молекула фосфоглицерата, состоящая из трех атомов С; таким образом, из гликолата — этого "отхода производства" — извлекаются три атома углерода из каждых четырех. Поскольку такие промежуточные продукты, как глицин, могут эффективнее синтезироваться иными способами, данный путь, по-видимому, не имеет никаких других функций, кроме только что рассмотренной.
Теряющийся при этом углерод — это тот углерод, на фиксацию которого уже была затрачена энергия. К тому же аммиак, который выделяется при окислении глицина в серии, надо снова включать в состав аминокислот с затратой АТФ.
Краткое резюме по фотодыханию
1. Фотодыхание — это светозависимое поглощение кислорода и выделение СО2.
2. Оно не имеет никакого отношения к обычному ("темновому") дыханию.
3. Оно происходит в результате того, что рибулозобисфосфат-карбоксилаза взаимодействует не только с СО2, но и с молекулярным кислородом; в результате образуется совсем ненужный гликолат. Все остальные реакции этого пути служат лишь для возвращения части углерода из гликолата.
4. Две молекулы гликолата (содержащие четыре атома углерода) превращаются в одну молекулу фосфоглицерата (с тремя атомами углерода), и при этом расходуется энергия. Участие кислорода приводит к тому, что четвертый атом углерода бесполезно теряется в виде СО2.
5. Фотодыхание снижает потенциальную урожайность С3-растений на 30-40%.
9.8.2. С4-фотосинтез
В 1965 г. было показано, что у одного из тропических растений — сахарного тростника — первыми продуктами фотосинтеза, по-видимому, являются кислоты, содержащие четыре атома углерода (яблочная, щавелевоуксусная и аспарагиновая), а не С3-кислота (фосфоглицериновая), как у хлореллы и у большинства растений умеренной зоны. С тех пор было выявлено много других растений, главным образом тропических (и в том числе имеющих важное хозяйственное значение), у которых наблюдалась точно такая же картина; они были названы С4-растениями. Из однодольных к ним принадлежат, например, кукуруза (Zed), сорго (Sorghum), сахарный тростник (Sacchamm), просо (Eleusine), а из двудольных — Amaranthus и некоторые виды Euphorbia. Растения, у которых первым продуктом фотосинтеза является С3-кислота (ФГК), называют С3-растениями. Биохимию именно таких растений мы до сих пор и рассматривали в этой главе.
В 1966 г. австралийские исследователи Хэтч и Слэк показали, что С4-растения гораздо эффективнее поглощают двуокись углерода, чем С3-растения: в экспериментальной камере они снижали концентрацию СО2 в газовой фазе до 0,1 ч. на млн., а С3-растения-только до 50-100 ч. на млн. Это говорит о том, что у С4-растений низкая углекислотная точка компенсации. У таких растений практически незаметно фото дыхание.
Этот новый путь превращений углерода у С4-растений называют путем Хэтча-Слэка. Хотя этот процесс несколько различен у разных видов, мы рассмотрим, как он идет у типичного С4-растения — кукурузы. Для С4-растений характерно особое анатомическое строение листа: все проводящие пучки у них окружены двойным слоем клеток. Хлоропласты клеток внутреннего слоя — обкладки проводящего пучка — отличаются по форме от хлоропластов в клетках мезофилла, из которых состоит наружный слой (диморфизм хлоропластов). На рис. 9.29, А и Б показано, как выглядит эта так называемая "кранц-анатомия" (от нем. Kranz — корона, венец, кольцо; при этом имеются в виду два клеточных слоя, на срезе имеющие вид колец). Ниже мы рассмотрим биохимические реакции С4-пути (см. рис. 9.30).
Рис. 9.29. А. 'Кранц-анатомия', характерная для С4-растений. Микрофотография поперечного среза листа росички кроваво-красной (Digitaria sanguinalis), демонстрирующая диморфизм хлоропласте в клетках мезофилла и клетках обкладки проводящих пучков. В клетках мезофилла видны многочисленные граны, а в клетках обкладки проводящих пучков содержатся только отдельные рудиментарные граны. В обоих случаях видны зерна крахмала, × 4000. Б. Электронная микрофотография листа кукурузы. В клетках мезофилла и в клетках обкладки проводящих пучков видны хлоропласты двух типов, × 9900
Рис. 9.30. Упрощенная схема С4-пути, сопряженного с фиксацией двуокиси углерода. Показано, как двуокись углерода попадает из воздуха в клетки обкладки проводящих пучков и как происходит ее окончательная фиксация в составе С3-кислоты — ФГК
Путь Хэтча-Слэка
Это путь, связанный с транспортировкой СО2 и водорода из клеток мезофилла в клетки обкладки проводящего пучка. В этих клетках двуокись углерода фиксируется точно так же, как и у С3-растений (рис. 9.30), а водород используется для ее восстановления.
Фиксация двуокиси углерода в клетках мезофилла. СО2 фиксируется в цитоплазме клеток мезофилла в соответствии с уравнением:
Акцептором СО2 служит фосфоенолпируват (ФЕП), а не рибулозобисфосфат (РиБФ), а вместо РиБФ-карбоксилазы в этой реакции участвует ФЕП-карбоксилаза. У этого фермента есть два громадных преимущества перед РиБФ-карбоксилазой. Во-первых, у него более высокое сродство к СО2, и, во-вторых, он не взаимодействует с кислородом и поэтому не участвует в фотодыхании. Образующийся оксалоацетат превращается в малат или аспартат, которые содержат по 4 атома углерода. У этих кислот две карбоксильные (-СООН) группы, т. е. это дикарбоновые кислоты.